Charles Estienne (łac. Carolus Stephanus, ur. 1504, zm. 1564) – francuski lekarz, anatom i drukarz.
Życiorys Urodzony w 1504 r. jako najmłodszy syn Henri Estienne′a. Pochodził z paryskiej rodziny drukarzy, którzy wydawali popularne edycje Biblii, słownika łacińskiego i prac naukowych. Podobnie jak krewni, Estienne posługiwał się łacińską formą nazwiska – Stephanus. Odebrał typowe wykształcenie humanistyczne.
W latach 1530–1534 przebywał w Padwie, gdzie zainteresował się medycyną. Po powrocie do Paryża pracował w rodzinnej drukarni i udzielał prywatnych lekcji. Od 1535 do 1539 r. był studentem paryskiego uniwersytetu. Podczas studiów w Paryżu poznał Andreasa Vesaliusa, który również był wówczas studentem. Ostatecznie Estienne uzyskał dyplom lekarski na Uniwersytecie Paryskim w 1542 r. Nie wiadomo jednak czy kiedykolwiek prowadził wykłady lub zajmował inne stanowiska akademickie.
Pomimo klasycznego wykształcenia nie był tak mocno przywiązany do tradycji Galena jak jego nauczyciel Jacques Dubois, jednak pozostawał pod jej wpływem. Estienne jako pierwszy zaobserwował zastawki w żyłach i jako pierwszy stwierdził wnikanie naczyń włosowatych do wnętrza kości.