Pierwszy rejs bojowy i utrata okrętu 1 listopada 1941 roku U-574 osiągnął gotowość bojową, pozostając nadal w składzie 1. Flotylli U-Bootów. 8 listopada wyszedł z Kilonii, udając się w swój pierwszy wojenny atlantycki rejs. W dniach 14 listopada – 1 grudnia wchodził w skład wilczego stada „Steuben”. 11 grudnia w tajemnicy zawinął do neutralnego hiszpańskiego portu Vigo, gdzie uzupełnił zapasy paliwa. 14 grudnia został przyporządkowany do wilczego stada „Seeräuber”, które powstało w celu zaatakowania zmierzającego z Gibraltaru na Wyspy Brytyjskie konwoju HG-76. 17 grudnia U-574, , i U-131 zajęły pozycje w pobliżu konwoju. 19 grudnia w odległości około 330 Mm na zachód od Sines U-574 wykrył płynący na końcu konwoju HG-76 brytyjski niszczyciel (1190 ton), w kierunku którego o godzinie 4:15 wystrzelił trzy torpedy. Trafiony dwiema torpedami niszczyciel natychmiast zatonął na pozycji , a na jego pokładzie zginęło 136 z liczącej 161 osób załogi.