Poszczególne klony tego gatunku dożywać mogą ponad 200 lat.
Rozmnażanie Czworolist rozmnaża się zarówno wegetatywnie, poprzez usamodzielniające się z czasem odgałęzienia kłącza, jak i generatywnie, poprzez nasiona (nasiona nie tworzą jednak trwałego banku nasion). Kwiat czworolistu nie wytwarza nektaru, jednak dużym i barwnym słupkiem, który swoim wyglądem naśladuje kawałek mięsa lub duży miodnik, zwabia padlinożerne muchówki (stanowi przykład kwiatu zwodniczego). Nie zapewnia im żadnych korzyści, ale zwabione owady dokonują jego zapylenia. Kwiat jest przy tym przedsłupny, co ułatwia zapylenie krzyżowe. Według niektórych źródeł kwiaty czworolistu mogą być wiatropylne. Dodatkowo przy braku owadów zapylających i wiatru pod koniec kwitnienia dochodzi do samozapylenia – pręciki pochylają się nad znamieniem. Nasiona rozsiewane są głównie przez gryzonie, zwłaszcza nornicę rudą i myszarki, zbierające do 80% owoców. Zwierzęta te wyjadają nasiona, jednak część z nich pozostawiają w miąższu umożliwiając rozprzestrzenianie się roślin na średni dystans 0,21-0,33 m na rok.