Na części przyznanych synom majątków wojewoda kijowski zastrzegł sobie dożywocie.
Na początku XVII wieku (po śmierci księcia Konstantego Wasyla oraz jego syna Aleksandra) nastąpił wyraźny regres Akademii Ostrogskiej. Wówczas pozycję zwierzchnią w rodzie uzyskał Janusz Ostrogski, katolicki konwertyta. Ostróg stracił na znaczeniu jako wiodący ośrodek myśli prawosławnej w kraju.
W roku 1581 drukarnia ostrogska, prowadzona przez Iwana Fedorowicza, wydała Biblię ostrogską, pierwszą edycję Biblii w języku cerkiewnosłowiańskim, pod redakcją Smotryckiego.
Drzewo
Iwan Ostrogski ∞ Maria Bielska Semen Holszański ∞ Anastazja Zbaraska (Nieświcka)Jan Tarnowski ∞ Barbara Szydłowiecki ∞ XJakub Kostka ∞ Anna Rokus von Sehfeldenvon Eulenburg ∞ XJan Odrowąż ∞ Anna Jarosławska-TarnowskaKonrad III ∞ Anna Radziwiłłówna Konstanty Ostrogski (1460-1530) herbu OstrogskiSyn Konstantego Ostrogskiego (1460–1530) i Marii Iwanowny Bielskiej ∞ Tatiana Holszańska (+1521) herbu HippocentaurusCórka Semena Holszańskiego (+1505) i Anastazji Zbaraskiej (Nieświckiej) Aleksandra Słucka (1490–1555), h.