Studiował na Illinois State University w Normal.
Kariera W 1974 Sinise i jego dwaj przyjaciele – Terry Kinney i Jeff Perry – założyli Steppenwolf Theatre Company w Chicago, gdzie występowali znani aktorzy, tacy jak Joan Allen, Kevin Anderson, Gary Cole, Ethan Hawke, Glenne Headly, John Mahoney, John Malkovich, Laurie Metcalf, Martha Plimpton, Jim True-Frost i William Petersen. Sinise w Steppenwolf doskonalił swoje umiejętności aktorskie i reżyserskie, a także otrzymał nagrodę im. Josepha Jeffersona za reżyserię sztuki Lyle'a Kesslera Sierżanci (Orphans).
Zadebiutował na kinowym ekranie w czarnej komedii Dzień weselny (A Wedding, 1978) z Carol Burnett i Mią Farrow. Potem pojawił się w jednym z odcinków opery mydlanej CBS Knots Landing – pt.: „Small Surprises”.
W 1982 wyreżyserował i zagrał w przedstawieniu Sama Sheparda True West z Johnem Malkovichem, a za reżyserię w 1983 zdobył nagrodę Obie Award. Rok później wziął udział wraz z Malkovichem w produkcji PBS American Playhouse.
Przełom w ekranowej karierze nastąpił w 1992, kiedy wyreżyserował i zagrał główną rolę w ekranizacji znanej powieści Johna Steinbecka Myszy i ludzie.