Pomimo licznych ról w teatrze, telewizji i kinie, Macnee stał się najbardziej znany jako tajny agent John Steed, którego znakiem rozpoznawczym był parasol i melonik w serialu kryminalnym ABC Rewolwer i melonik (The Avengers, 1961–1969) i sequelu Nowy rewolwer i melonik (The New Avengers, 1976–1977).
Był trzykrotnie żonaty; z Barbarą Douglas (od listopada 1942 do 1956), z którą ma syna Ruperta Macnee i córkę Jenny Macnee, aktorką Katherine Woodville (1965–1969) i Babą Majos de Nagyzsenye Sekely (od 25 listopada 1988). Zmarł z przyczyn naturalnych w Rancho Mirage w Kalifornii, mając 93 lata.
Filmografia Filmy kinowe 1992: Gabinet figur woskowych 2: Zagubieni w czasie (Waxwork II: Lost in Time) jako sir Wilfred 1988: Rewolwer i melonik (The Avengers) jako Niewidzialny Jones (głos) 1988: Gabinet figur woskowych (Waxwork) jako sir Wilfred 1985: Zabójczy widok (A View to a Kill) jako sir Godfrey Tibbett 1981: Skowyt (The Howling) jako dr George Waggner 1957: Roztańczone dziewczyny (Les Girls) jako sir Percy 1956: Bitwa o ujście rzeki (The Battle of the River Plate) jako komandor Medley 1948: Fatalna noc (The Fatal Night) jako Tony 1943: Życie i śmierć pułkownika Blimpa (The Life and Death of Colonel Blimp) 1938: Pigmalion (Pygmalion)