Obok głównych bohaterów spotykamy również wachlarz postaci znanych z folkloru jak i kart historii. Kolejne odcinki oprócz podróży po odległych zakątkach ziemi w poszukiwaniu istot zagrożonych lub niebezpiecznych dla innych, walczą z członkami organizacji KABAL, chcącymi wykorzystać do swoich celów zdolności „niezwykłych”. Przez cały czas poznajemy także tajemnice i wydarzenia z przeszłości głównych bohaterów, które sprawiły, że spotkali się w tym niezwykłym miejscu.
Obsada Amanda Tapping jako dr Helen Magnus – angielska lekarka i badaczka, która poświęciła swe życie poszukiwaniu i chronieniu niezwykłych istot i osób ze zdolnościami nadprzyrodzonymi. Prowadzi tytułowe Sanktuarium, gdzie niezwykli mogą znaleźć schronienie i opiekę, w czasie gdy ona sama poświęca się próbom lepszego zrozumienia tych istot. Robin Dunne jako dr Will Zimmerman – były psychiatra sądowy, który zostaje zrekrutowany przez dr Magnus do pomocy. Ryan Robbins jako Henry Foss (webisody, gościnnie seria 1, główny sezony 2-4) – technik komputerowy pracujący w Sanktuarium; likantrop. Christopher Heyerdahl jako Wielka Stopa – były pacjent dr Magnus, który nie chciał opuścić placówki po wyzdrowieniu;