I liga 2009/2010 – 62. edycja drugiej w hierarchii klasy rozgrywkowej w polskiej piłce nożnej mężczyzn. Sponsorem tytularnym rozgrywek była firma bukmacherska Unibet, lecz w związku z wprowadzoną ustawą o grach hazardowych umowa została bezterminowo zawieszona przed rundą wiosenną.
Drużyny W I lidze występowało 18 zespołów, które walczyły o awans do Ekstraklasy:
Objaśnienia: ŁKS Łódź nie otrzymał licencji na grę w Ekstraklasie w sezonie 2009/2010 i został przesunięty z 7. na 16. miejsce w tabeli sezonu 2008/2009. Widzew Łódź nie uzyskał awansu w związku z uznaniem za wiążącą kary degradacji o jedną klasę rozgrywkową przed sezonem 2008/2009. GKP Gorzów Wielkopolski wygrał baraże o I ligę. GKS Jastrzębie nie otrzymał licencji na grę w I lidze. W jego miejsce w rozgrywkach wystąpiła drużyna Motoru Lublin.
Rozgrywki W sezonie 2009/2010 drużyny rozegrają 34 kolejki ligowe po 9 meczów (razem 306 spotkań) w dwóch rundach: jesiennej i wiosennej.
Dwa czołowe miejsca w końcowej tabeli premiowane były awansem do Ekstraklasy.