Po związaniu kodonu AUG z antykodonem inicjatorowego tRNAiMet czynnik eIF5 (białko aktywujące GTPazę) przyłącza się do kompleksu inicjacyjnego i indukuje hydrolizę GTP przez eIF2. Wówczas czynniki inicjacyjne, a wśród nich eIF2, teraz związane z GDP (guanozynodwufosforanem), są uwalniane z kompleksu 48S, a następnie przyłącza się do niego podjednostka rybosomu 60S i powstaje kompleks inicjacyjny 80S. Wtedy rozpoczyna się etap elongacji.
Uwolnione eIF2 związane z GDP jest nieaktywne. GDP jest wymieniane na GTP z udziałem białka eIF2B (czynnika wymiany nukleotydów guaninowych, ang. Guanine nucleotide exchange factor). Po przyłączeniu tRNAiMet eIF2 w kompleksie potrójnym jest znów gotowe do udziału w kolejnej inicjacji translacji.
Struktura eIF2 jest heterotrimerem o masie 126 kDa.