Pojawił się w niej jako aktor, a także skomponował do niej muzykę pod pseudonimem „Gelg”.
W 2004 roku wystąpił w filmie Edgara Wrighta Wysyp żywych trupów w roli Pete’a, współlokatora głównego bohatera, Shauna (ponownie granego przez Simona Pegga).
W 2007 roku premierę miał The Peter Serafinowicz Show, za który to otrzymał nagrodę Rose d’Or w kategorii „Best Entertainer”. Program nominowany był również do nagrody BAFTA w 2009 roku.
Serafinowicz znany jest z parodiowania znanych osobistości, takich jak Terry Wogan, Paul McCartney, Al Pacino czy Alan Alda.
Grał również w takich serialach, jak Smack the Pony, Hippies (1999), Black Books (2000), Mówi Alan Partridge (2002), Mała Brytania (2003), Murder Most Horrid (1999), Agatha Christie: Miss Marple (2005), Morderca z Whitechapel oraz amerykańskim serialu komediowym Mój najlepszy wróg (2010). Głosu użyczał w serialach animowanych Miasteczko South Park (2006) i Archer (2011) oraz w grze Assassin’s Creed III.
Wyreżyserował teledyski do utworów „I Feel Better”, „Night & Day” i „Don't Deny Your Heart” brytyjskiej grupy Hot Chip.
Jako reżyser filmowy zadebiutuje czarną komedią I See What You Did There, nad którą pracuje wraz z Dannym Wallace’em.