Posługuje się kombinezonem, dzięki któremu może się pomniejszyć jak i powiększyć. Emily VanCamp jako Sharon Carter, była agentka T.A.R.C.Z.Y., która staje po stronie frakcji przeciwnej regulacjom, której liderem jest Rogers. Tom Holland jako Peter Parker / Spider-Man, nastolatek posiadający pajęcze zdolności w wyniku ugryzienia przez genetycznie zmodyfikowanego pająka, który staje po stronie frakcji popierającej regulacje, której liderem jest Stark. Frank Grillo jako Brock Rumlow / Crossbones, były dowódca T.A.R.C.Z.Y., kierujący jednostką antyterrorystyczną S.T.R.I.K.E., który okazał się być agentem Hydry. William Hurt jako Thaddeus „Thunderbolt” Ross, sekretarz stanu Stanów Zjednoczonych i były generał armii amerykańskiej. Daniel Brühl jako Helmut Zemo, terrorysta z Sokowii, który ma obsesję na punkcie pokonania Avengers.
Swoje role z poprzednich filmów franczyzy powtórzyli: John Slattery jako Howard Stark, ojciec Tony’ego Starka oraz Kerry Condon jako F.R.I.D.A.Y., komputerowa sztuczna inteligencja stworzona przez Starka, która zarządza jego posiadłością i zbrojami.