Protein 8 sa domenom cinkovog prsta CCHC je protein koji ljudi kodiran genom ZCCHC8. Hartz (2015) locirala je gen ZCCHC8 na hromosomu 12, sekvenca q24.31, na osnovu poravnavanja sekvence ZCCHC8 (GenBank BC017704) sa genomskom sekvencom (GRCh38).Hartz, P. A. Personal Communication. Baltimore, Md. 5/21/201

Aminokiselinska sekvenca Dužina polipeptidnog lanca je 707 aminokiselina, a molekulska težina 78.577 Da..

1020304050 MAAEVYFGDLELFEPFDHPEESIPKPVHTRFKDDDGDEEDENGVGDAELR ERLRQCEETIEQLRAENQELKRKLNILTRPSGILVNDTKLDGPILQILFM NNAISKQYHQEIEEFVSNLVKRFEEQQKNDVEKTSFNLLPQPSSIVLEED HKVEESCAIKNNKEAFSVVGSVLYFTNFCLDKLGQPLLNENPQLSEGWEI PKYHQVFSHIVSLEGQEIQVKAKRPKPHCFNCGSEEHQMKDCPMPRNAAR ISEKRKEYMDACGEANNQNFQQRYHAEEVEERFGRFKPGVISEELQDALG VTDKSLPPFIYRMRQLGYPPGWLKEAELENSGLALYDGKDGTDGETEVGE IQQNKSVTYDLSKLVNYPGFNISTPRGIPDEWRIFGSIPMQACQQKDVFA NYLTSNFQAPGVKSGNKRSSSHSSPGSPKKQKNESNSAGSPADMELDSDM EVPHGSQSSESFQFQPPLPPDTPPLPRGTPPPVFTPPLPKGTPPLTPSDS PQTRTASGAVDEDALTLEELEEQQRRIWAALEQAESVNSDSDVPVDTPLT GNSVASSPCPNELDLPVPEGKTSEKQTLDEPEVPEIFTKKSEAGHASSPD SEVTSLCQKEKAELAPVNTEGALLDNGSVVPNCDISNGGSQKLFPADTSP STATKIHSPIPDMSKFATGITPFEFENMAESTGMYLRIRSLLKNSPRNQQ KNKKASE Simboli

C: Cistein D: Asparaginska kiselina E: Glutaminska kiselina F: Fenilalanin G: Glicin H: Histidin I: Izoleucin K: Lizin L: Leucin M: Metionin N: Asparagin P: Prolin Q: Glutamin R: Arginin S: Serin T: Treonin V: Valin W: Triptofan Y: Tirozin

Kloniranje i ekspresija SDS-PAGE i masenom spektrometrijom proteina HeLa ćelija, Gustafson et al. (2005) identificirali su ZCCHC8, koji je unakrsno reagovao sa antitijelom usmjerenim na GSK3 mesto fosforilacije u MYC. CCHC domen ZCCHC8 uglavnom se nalazi u proteinima koji vežu nukleinske kiseline. U ljudskim ćelijskim linijama, ZCCHC8 se lokalizirao u jedru, ali je isključen iz nukleolusa. Imao je prividnu molekulsku masu od 105 kD, pomoću SDS-PAGE.Gustafson, M. P., Welcker, M., Hwang, H. C., Clurman, B. E. Zcchc8 is a glycogen synthase kinase-3 substrate that interacts with RNA-binding proteins. Biochem. Biophys. Res. Commun. 338: 1359-1367, 2005. PubMed: 16263084

Funkcija gena Gustafson et al. (2005) utvrdili su da je ZCCHC8 u ljudskim ćelijama i ćelijskim linijama fosforiliran na thr492 (T492). Ukupni nivoi ZCCHC8 blago su porasli kako su ćelije ušle u S-fazu, ali se fosforilacija T492 povećala tek kada su ćelije ušle u mitozu. Inhibicija GSK3, tretmanom litijem ili kotransfekcija domena u interakciji AXIN (AXIN1) GSK3 uveliko smanjuje fosforilaciju ZCCHC8 T492. Koristeći ZCCHC8 kaosondu u tandemskom afinitetskom prečišćavanju lizata ćelija HeLa, nakon čega slijedi SDS-PAGE i masena spektrometrijska analiza, otkrili su da je ZCCHC8 bio u interakciji s faktorom prerade RNK RBM7 i s DExH kutijskom RNK-helikazom SKIV2L2. Kotransfekcija ćelija HeLa potvrdila je da je ZCCHC8 bio u interakciji sa epitopom označenim kao RBM7 i SKIV2L2.

Gable et al. (2019) otkrili su da je destrukcija ZCCHC8 u HeLa ćelijama, pomoću shRNK rezultiralo smanjenjem razine TERC -a. Dodatne detaljne ćelijske studije pokazale su da je ZCCHC8 potreban za sazrijevanje TERC-a i funkciju telomeraza, posebno posreduje u ciljanju primarnog kraja TERC 3 prema egzosomu jedarne RNK. U tri člana porodice sa plućnom fibrozom povezanom sa telomerama i/ili zatajenjem koštane srži-5 (PFBMFT5; 618674), Gable et al. (2019) identificirali su heterozigotnu misens mutaciju u genu ZCCHC8 (P186L). Mutacija, koja je pronađena kombinacijom analize vezanosti i sekvenciranja cijelog genoma i potvrđena Sangerovim sekvenciranjem, odvojena je od poremećaja u porodici. Dva mlađa asimptomska člana porodice koja su imala kratke telomere također su nosila mutaciju. Mutacija nije pronađena u bazama podataka 1000 Genomes Project, Exome Sequencing Project, ExAC ili gnomAD. Analiza ćelija pacijenata pokazala je 50% smanjenje nivoa proteina ZCCHC8 u odnosu na kontrole, što ukazuje na to da je mutacija ugrozila stabilnost proteina. Ćelije pacijenata također su pokazale disregulaciju obrade RNK, s abnormalnom akumulacijom prekursora TERC-a na račun zrelog TERC-a.

Životinjski model Gable et al. (2019) otkrili su da je homozigotni gubitak Zcchc8 kod miševa rezultirao postnatalnom smrtonosnošću za 70 dana. Zcchc8-nula miševi pokazali su progresivne neurorazvojne nedostatke, s malim volumenom mozga, defektnom neurogenezom i hidrocefalusom. Neke od karakteristika bile su u skladu s ciliopatijom. Ove abnormalnosti bile su povezane s neispravnim prijenosom transkripata RNK-polimeraze II s niskim sadržajem i nenormalnom akumulacijom dugolančanih RNK s niskim sadržajem, uključujući histone i RNK koji kodiraju proteinske komponente cilija. Nalazi su bili u skladu s disregulacijom obrade RNK.Gable, D. L., Gaysinskaya, V., Atik, C. C. Talbot, C. C., Jr., Kang, B., Stanley, S. E., Pugh, E. W., Amat-Codina, N., Schenk, K. M., Arcasoy, M. O., Brayton, C., Florea, L., Armanios, M. ZCCHC8, the nuclear exosome targeting component, is mutated in familial pulmonary fibrosis and is required for telomerase RNA maturation. Genes Dev. 33: 1381-1396, 2019. PubMed: 31488579

Reference

Dopunska literatura

Kategorija:Geni na hromosomu 12 Kategorija:Ljudski proteini Kategorija:Proteomika