pienoiskuva|DNA-ligaasi korjaamassa vauriota kromosomissa Liittäjäentsyymi eli ligaasi (latinan sanasta ligāre – ”sitoa yhteen”, ”liimata yhteen”) on entsyymi joka kykenee nopeuttamaan kahden molekyylin yhteensitoutumisen luomalla uuden kemiallisen sidoksen, yleensä toisen kohdemolekyylin, tyypillisesti ATP:n kemiallisen alaryhmän hydrolyysin avulla. Yleisesti ottaen liittäjäentsyymi nopeuttaa seuraavaa reaktiota:
Ab + C → A–C + b
tai joskus
Ab + cD → A–D + b + c
jossa pienet aakkoset kuvaavat kemiallisia alaryhmiä.
Liittäjäentsyymien luokittelu Kaikkien liittäjäentsyymien EC-numero alkaa numerolla 6. EC-numerot määräytyvät eri liittäjäentsyymien nopeuttamien reaktioiden mukaan seuraavasti.
EC6.1.x.x – Entsyymit nopeuttavat hiili-happisidoksen muodostumista EC6.2.x.x – Entsyymit nopeuttavat hiili-rikkisidoksen muodostumista EC6.3.x.x – Entsyymit nopeuttavat hiili-typpisidoksen muodostumista EC6.4.x.x – Entsyymit nopeuttavat hiili-hiilisidoksen muodostumista EC6.5.x.x – Entsyymit nopeuttavat fosfaattiesterisidoksen muodostumista EC6.6.x.x – Entsyymit nopeuttavat metalli-typpisidoksen muodostumista
DNA-liittäjäentsyymi DNA-juosteita yhteen muodostamalla kovalenttisia sidoksia juosteiden päiden välille. Toisessa yhteenliitettävässä päässä on oltava 5'-fosfaattiryhmä ja toisessa 3'-OH-ryhmä. Liittäjäentsyymit ovat tärkeitä geenitekniikan työvälineitä ja yleisimmin käytettävä T4-liittäjäentsyymi on peräisin kolibakteerista.
DNA-liittäjäentsyymin toiminta
Kuvassa kaksi DNA-juostetta ennen liittäjäentsyymin aiheuttamaa juosteiden yhteenliittymistä. Vapaat OH-ryhmät sijaitsevat punaisella merkityn juosteen ylemmän rihman oikeanpuolimmaisessa tymiinissä (T) ja sinisellä merkityn juosteen alemman rihman vasemmanpuolimmaisessa sytosiinissa (C). Vastaavasti vapaat fosfaattiryhmät sijaitsevat punaisella merkityn juosteen alemman rihman oikeanpuolimmaisessa guaniinissa (G) ja sinisellä merkityn juosteen ylemmän rihman vasemmanpuolimmaisessa guaniinissa.
Tiedosto:DNA before ligase.PNG
Liittäjäentsyymi yhdistää juosteet niin, että sen tekemän liitoksen muodostavat toisen juosteen fosfaattiryhmä ja toisen juosteen OH-ryhmä. Lopputuloksena on ehjä kaksijuosteinen DNA-molekyyli.
Tiedosto:DNA after ligase.PNG
Katso myös Katkaisuentsyymit
Lähteet
Aiheesta muualla
Luokka:Molekyylibiologia Luokka:Ligaasit