Жёлтый флуоресцентный белок () — генетическая мутантная форма зелёного флуоресцентного белка (GFP), выделенного из медузы эквореи Aequorea victoria. Характеризуется максимумом поглощения при 514 нм и максимумом флуоресценции при 527 нм. Широко используется в качестве флуоресцентной метки в клеточной и молекулярной биологии для изучения экспрессии клеточных белков. Кроме него разработана серия других мутантных форм GFP, таких как синий, циановый и др.

Применение для FRET Спектр поглощения YFP довольно сильно пересекается со спектром флуоресценции CFP (), поэтому эти два флюорофора используются для создания биосенсоров, в основе работы которых лежит явление Фёрстеровского переноса энергии (FRET). Такие сенсоры используются для выявления определённых событий, происходящих в живых клетках. В частности, таким образом можно определять активность ферментов.

Как правило, молекула такого сенсора включает в себя 4 домена: белок, являющийся носителем сенсора (это может быть практически любой белок); флюорофор CFP; домен, меняющий свою структуру в ответ на определённое воздействие (например, фосфорилирование); флюорофор YFP.

При облучении такого сенсора лазером с длиной волны, возбуждающей только CFP (например, 440 нм — почти не возбуждает YFP, но сильно возбуждает CFP), можно наблюдать флуоресценцию обоих флюорофоров. После соответствующего воздействия на домен 3 происходит изменение структуры сенсора, в результате чего флюорофор YFP отдаляется от CFP и эффективность Фёрстеровского переноса падает (в зависимости от того, на какое расстояние флюорофоры были отдалены друг от друга). В результате интенсивность флуоресценции CFP возрастает, а YFP — падает. Таким образом, по отношению флуоресценции YFP к флуоресценции CFP можно количественно оценить изменение конформации биосенсора.

См. также Зелёный флуоресцентный белок Роджер Тсиен Флуоресценция в биологических исследованиях

Примечания

Литература

Ссылки Флуоресцентные белки Introduction to fluorescent proteins (Введение во флуоресцентные белки) Спектры поглощения и флуоресценции CFP, YFP и некоторых других флюорофоров

Категория:Флуоресцентные белки