У другому розіграші Кубка другої ліги України з футболу сезону 2000/2001 року взяли участь 44 команди другої ліги. Проходив з 29 липня 2000 року по 9 травня 2001 року.
Учасники «Авангард» (Ровеньки) «АДОМС» (Кременчук) «Арсенал» (Харків) «Верес» (Рівне) «Ворскла-2» (Полтава) «Газовик» (Комарно) «Галичина» (Дрогобич) «Гірник-Спорт» (Комсомольськ) «Динамо» (Львів) «Динамо-3» (Київ) «Десна» (Чернігів) «Дніпро-3» (Дніпропетровськ) «Енергетик» (Бурштин) «Зоря» (Луганськ) ФК «Калуш»«Карпати-2» (Львів) ФК «Красилів» «Кривбас-2» (Кривий Ріг) «Машинобудівник» (Дружківка) «Металіст-2» (Харків) «Металург-2» (Маріуполь) «Металург-2» (Запоріжжя) «Нафтовик» (Долина) «Оболонь-ППО» (Київ) «Олімпія ФК АЕС» (Южноукраїнськ) «Олком» (Мелітополь) «Оскіл» (Куп'янськ) «Полісся» (Житомир) «Портовик» (Іллічівськ) «Прикарпаття-2» (Івано-Франківськ)«Ригонда» (Біла Церква) «Система-Борекс» (Бородянка) «Сокіл» (Золочів) «Сталь-2» (Алчевськ) «Тернопіль-Нива-2» (Тернопіль) «Техно-Центр» (Рогатин) «Титан» (Армянськ) «Торпедо» (Запоріжжя) «Фрунзенець-Ліга-99» (Суми) СК «Херсон» «Цементник-Хорда» (Миколаїв) ФК «Черкаси-2» «Чорноморець-2» (Одеса) «Шахтар-3» (Донецьк)
Перелік матчів Попередній етап 29 липня 2000 року. «Тернопіль-Нива-2» (Тернопіль)0:3 ФК «Красилів» «Сокіл» (Золочів)4:0 ФК «Калуш» «Карпати-2» (Львів)2:1 «Галичина» (Дрогобич) «Динамо-3» (Київ)+:- «Верес» (Рівне)Відмова «Вереса» «Прикарпаття-2» (Івано-Франківськ)0:0 «Техно-Центр» (Рогатин)дч, пен. 4:2 «Десна» (Чернігів)3:1 «Ригонда» (Біла Церква) ФК «Черкаси-2»2:1 «Гірник-Спорт» (Комсомольськ) «Дніпро-3» (Дніпропетровськ)1:2 «Фрунзенець-Ліга-99» (Суми) СК «Херсон»0:1 «Титан» (Армянськ) «Металург-2» (Запоріжжя)3:1 «Олком» (Мелітополь) «Портовик» (Іллічівськ)0:2 «Олімпія ФК АЕС» (Южноукраїнськ) «Сталь-2» (Алчевськ)1:0 «Авангард» (Ровеньки)
1/16 фіналу 6 серпня 2000 року. «Олімпія ФК АЕС» (Южноукраїнськ)2:0 «Чорноморець-2» (Одеса) «Сокіл» (Золочів)1:0 «Газовик» (Комарно) «Машинобудівник» (Дружківка)2:0 «Металург-2» (Маріуполь) «Енергетик» (Бурштин)5:0 «Динамо» (Львів) «Металург-2» (Запоріжжя)1:0 «Торпедо» (Запоріжжя) «Прикарпаття-2» (Івано-Франківськ)1:5 «Полісся» (Житомир) «Зоря» (Луганськ)6:2 «Сталь-2» (Алчевськ)) «Титан» (Армянськ)3:1 «Кривбас-2» (Кривий Ріг) «Шахтар-3» (Донецьк)2:0 «Металіст-2» (Харків) «Ворскла-2» (Полтава)0:2 «Арсенал» (Харків) «Десна» (Чернігів)1:1 «Оболонь-ППО» (Київ)дч, пен. 5:6 ФК «Красилів»2:3 «Нафтовик» (Долина) «Динамо-3» (Київ)1:1 «Система-Борекс» (Бородянка)дч, пен. 2:3 «Цементник-Хорда» (Миколаїв)1:0 «Карпати-2» (Львів) «Фрунзенець-Ліга-99» (Суми)2:1 «Оскіл» (Куп'янськ) «АДОМС» (Кременчук)2:0 ФК «Черкаси-2»
1/8 фіналу 16 серпня 2000 року. «Система-Борекс» (Бородянка)0:1 «Полісся» (Житомир) «Оболонь-ППО» (Київ)2:0 «АДОМС» (Кременчук) «Фрунзенець-Ліга-99» (Суми)0:2 «Титан» (Армянськ) «Машинобудівник» (Дружківка)4:1 «Зоря» (Луганськ) «Нафтовик» (Долина)1:2 «Сокіл» (Золочів) «Цементник-Хорда» (Миколаїв)0:1 «Енергетик» (Бурштин) «Металург-2» (Запоріжжя)2:1 «Олімпія ФК АЕС» (Южноукраїнськ) «Арсенал» (Харків)1:0 «Шахтар-3» (Донецьк)дч
1/4 фіналу 30 серпня 2000 року. «Сокіл» (Золочів)1:0 «Енергетик» (Бурштин) «Полісся» (Житомир)4:0 «Оболонь-ППО» (Київ) «Титан» (Армянськ)1:0 «Металург-2» (Запоріжжя) «Машинобудівник» (Дружківка)3:2 «Арсенал» (Харків)дч
1/2 фіналу 2 травня 2001 року. «Сокіл» (Золочів)0:2 «Полісся» (Житомир) «Титан» (Армянськ)3:0 «Машинобудівник» (Дружківка)
Фінал
Володар Кубка другої ліги України 2000/2001 «Полісся» (Житомир) Вперше
Найкращі бомбардири Гравець Клуб Ігри Голи (пен.)
Підсумкова таблиця
Примітки
Див. також Чемпіонат України з футболу 2000—2001 Кубок України з футболу 2000—2001 Кубок другої ліги України з футболу 1999—2000
Джерела Кубок України 2000/2001 — Офіційний сайт ФФУ Кубок Украины 2000/2001 — Украинский футбол от Алексея Кобызева Кубок Украины 2000-2001 — Украинский футбол от Дмитрия Трощия Футбол. Кубок Украины 2000/01, все матчи — WildStat