Na terenie Malolotja Nature Reserve występują trzy rzadkie gatunki zgłowieni (sagowców z rodziny zamiowatych): , i . Są to gatunki charakterystyczne dla tzw. pasa zieleńcowego Barberton, występujące również w RPA. W rezerwacie rosną również okazy niewielkich drzew zagrożonego gatunku z rodziny korzeniarowatych. Na niżej położonych obszarach np. w dolinie Komati, Malolotji czy w lesie Mgwayiza występują drzewa z rodzaju Afrocarpus, Celtis oraz .
Fynbos na terenie rezerwatu porasta sześć gatunków srebrników (Protea), natomiast obszary torfowisk i vlei – liczne gatunki storczyków i amarylkowatych. W wąskich szczelinach między wychodniami skalnymi rośnie skrętnik wytwarzający jasnoczerwony kwiatostan w kształcie trąbki oraz duży, pojedynczy jasnozielony liść odżywiający roślinę, obumierający z chwilą wydania przez nią owoców.
Fauna thumb|Blesbok na terenie rezerwatu (2016) Fauna rezerwatu pozostaje stosunkowo słabo zbadana. Szacuje się, że na tym obszarze występują 124 gatunki motyli i aż 612 gatunków ciem. Kręgowce reprezentowane są przez 7 gatunków ryb, 21 gatunków płazów, 61 gatunków płazów, 271 (bądź ok. 290) gatunków ptaków oraz 56 gatunków ssaków.