Wśród postaci osiemnastowiecznych znajdują się m.in. Achilles Davenport (Roger Aaron Brown), mentor Ratonhnhaké:tona i emerytowany asasyn; matka Ratonhnhaké:tona Kaniehtí:io (Kaniehtiio Horn); pierwszy oficer Aquili Robert Faulkner (Kevin R. McNally) i francuski karczmarz Stephane Chapheau (Shawn Baichoo). Wśród templariuszy z kolonii znajduje się angielski szlachcic i ojciec Ratonhnhaké:tona Haytham Kenway (Adrian Hough), wspierany przez kilka postaci historycznych, którym scenarzyści również przypisali przynależność do zakonu templariuszy: Charles Lee (Neil Napier), Thomas Hickey (Allen Leech), John Pitcairn (Robert Lawrenson), Benjamin Church (Harry Standjofski), William Johnson (Julian Casey) i Nicholas Biddle. W grze pojawia się również kilka innych postaci historycznych, takich jak Israel Putnam (Andreas Apergis), George Washington (Robin Atkin Downes), Thomas Jefferson (John Emmet Tracy), Mason Weems (Tod Fennell), Paul Revere (Bruce Dinsmore), Edward Braddock czy Samuel Adams (Mark Lindsay Chapman).