W oryginalnej grze gracz miał do wyboru dwa scenariusze, a po zakończeniu jednego z nich mógł rozegrać drugi. Analogicznie w nowej odsłonie, pokonanie głównej kampanii po raz pierwszy odblokowuje możliwość zagrania jako drugi bohater. W drugim podejściu do gry główna kampania zmienia się i otrzymuje dodatkową zawartość, a fabuła dzieje się równolegle z wydarzeniami z pierwszej rozgrywki. Na przykład protagonista w drugim podejściu wejdzie do komisariatu innym wejściem i znajdzie kilka drzwi już odblokowanych przez protagonistę z pierwszego przejścia. Ukończenie gry po raz drugi jest również wymagane, aby poznać prawdziwe zakończenie głównej kampanii.
Fabuła Akcja gry toczy się w Raccoon City we wrześniu 1998 roku, dwa miesiące po wydarzeniach z Resident Evil. Większość mieszkańców zamieniła się w bezmyślne stworzenia pod wpływem działania wirusowej broni biologicznej znanej jako T-Virus, wyprodukowanej przez Umbrella Corporation. Gra rozpoczyna się na stacji benzynowej poza miastem, gdzie policjant Leon S. Kennedy poznaje studentkę Claire Redfield, która szuka swojego brata Chrisa.